Rabu, 27 Februari 2013

Metode Pembuatan Media Malt Agar untuk Kultur Fungi Endofit


Malt Agar adalah salah satu media umum yang digunakan dalam dunia mikrobiologi. Di banyak jurnal dan referensi, untuk jamur endofit media yang umum digunakan adalah Malt Agar. Selain mudah, media ini dinilai para peneliti paling efektif.

Untuk mengisolasi jamur endofit akara atau daun, rekan-rekan di Lab. Plant-Chemical Interaction Univ. of Tsukuba, Japan  tempat saya belajar sekarang menggunakan MA 1 % . Untuk membuat MA 1 % dengan takaran 400 ml ini bahan-bahan yang diperlukan adalah :
1. Malt Extract (4 g)
2. Agar (8g)
3. Air Suling (400 ml)

Tahapan pembuatannya adalah sebagai berikut :
1. Masukkan malt agar yang sudah ditimbang ke dalam erlenmeyer
2. Tambahkan air suling
3. Larutkan malt agar dengan menggunakan stirer. Di lab ini pengaduknya adalah ultrasonic cleaner. Bisa juga dipakai jika ada 

4. Masukkan agar ke dalam larutan malt dan aduk-aduk Erlenmeyer
5. Untuk menjaga kesterilannya, usap ujung tabung Erlenmeyer dengan alkohol
6. Tutup dengan aluminum foil di ujungnya  sebanyak 2 lapisan
7. Masukkan ke autoklaf dengan suhu 121⁰C dalam waktu 20 menit

Media siap digunakan.

Tuang media ke dalam petri dish yang sudah disterilkan. Untuk takaran biasa yang digunakan 1 petri dish jumlah media yang digunakan adalah 10 ml. Jadi untuk 400 ml, akan bisa digunakan untuk 40 petri dish. Pemindahan ini dilakukan di dalam Laminar Air Flow (LAF). Gunakan pula pipet yang steril. Setelah media mengeras, media bisa dibungkus denga plastik wrap dan disimpan untuk penggunaan selanjutnya.